Quelltext der Seite HyPer (Protein)

[[Datei:GFP structure.png|mini|GFP aus ''[[Aequorea victoria]]'', Wildtyp-Form.]]
'''HyPer''' ist eine [[Proteindesign|veränderte]] Variante des [[Grün fluoreszierendes Protein|grün fluoreszierenden Proteins]] (genauer: des YFP), bei der sich die [[Fluoreszenz]] [[Redox|redox]]-abhängig ändert.<ref>V. V. Belousov, A. F. Fradkov, K. A. Lukyanov, D. B. Staroverov, K. S. Shakhbazov, A. V. Terskikh, S. Lukyanov: ''Genetically encoded fluorescent indicator for intracellular hydrogen peroxide.'' In: ''[[Nature Methods]].'' Band 3, Nummer 4, April 2006, S.&nbsp;281–286, {{ISSN|1548-7091}}. {{DOI|10.1038/nmeth866}}. PMID 16554833.</ref>

== Eigenschaften ==
HyPer ist ein [[Fusionsprotein]] aus ''[[cpYFP]]'' und dem [[Wasserstoffperoxid]]-sensitiven bakteriellen Protein ''[[OxyR]]''.<ref>K. A. Lukyanov, V. V. Belousov: ''Genetically encoded fluorescent redox sensors.'' In: ''[[Biochimica et Biophysica Acta]].'' Band 1840, Nummer 2, Februar 2014, S.&nbsp;745–756, {{ISSN|0006-3002}}. {{DOI|10.1016/j.bbagen.2013.05.030}} (freier Volltext). PMID 23726987.</ref> Die [[Oxidation]] führt zu einer Spektralverschiebung der [[Absorption (Physik)|Absorption]] des HyPer von 420 nm zu 500 nm.

== Anwendungen ==
Das HyPer wird unter anderem als redox-abhängiger [[Biosensor]] und als [[Reporterprotein]] verwendet. Mit HyPer kann das Wasserstoffperoxid-abhängige [[Redox-Potential]] ''[[in vivo]]'' bestimmt werden.<ref name=Meyer_2007>{{cite journal |author=Meyer, A.J., Brach, T., Marty, L., Kreye, S., Rouhier, N., Jacquot, J.P., and Hell, R.|title= Redox-sensitive GFP in Arabidopsis thaliana is a quantitative biosensor for the redox potential of the cellular glutathione redox buffer. |journal=Plant J|volume=52 |issue=5 |pages=973–86 |year=2007 |doi= 10.1111/j.1365-313X.2007.03280.x|pmid= 17892447}}</ref><ref>S. G. Rhee, T. S. Chang, W. Jeong, D. Kang: ''Methods for detection and measurement of hydrogen peroxide inside and outside of cells.'' In: ''Molecules and cells.'' Band 29, Nummer 6, Juni 2010, S.&nbsp;539–549, {{ISSN|0219-1032}}. {{DOI|10.1007/s10059-010-0082-3}}. PMID 20526816.</ref>

Im [[Endoplasmatisches Retikulum|endoplasmatischen Retikulum]] kann mit HyPer die Bildung von Wasserstoffperoxid verfolgt werden.<ref>I. Mehmeti, S. Lortz, S. Lenzen: ''The H2O2-sensitive HyPer protein targeted to the endoplasmic reticulum as a mirror of the oxidizing thiol-disulfide milieu.'' In: ''[[Free Radical Biology and Medicine]].'' Band 53, Nummer 7, Oktober 2012, S.&nbsp;1451–1458, {{ISSN|1873-4596}}. {{DOI|10.1016/j.freeradbiomed.2012.08.010}}. PMID 22921589.</ref><ref>M. Exposito-Rodriguez, P. P. Laissue, G. R. Littlejohn, N. Smirnoff, P. M. Mullineaux: ''The use of HyPer to examine spatial and temporal changes in H2O2 in high light-exposed plants.'' In: ''[[Methods in Enzymology]].'' Band 527, 2013, S.&nbsp;185–201, {{ISSN|1557-7988}}. {{DOI|10.1016/B978-0-12-405882-8.00010-6}}. PMID 23830632.</ref>

Alternative optische Nachweisverfahren verwenden z. B. [[Resazurin]] (synonym AlamarBlue), [[Dichlorofluorescein]] (DCF) oder die Proteine [[roGFP]] oder [[rxYFP]].<ref>S. Pouvreau: ''Genetically encoded reactive oxygen species (ROS) and redox indicators.'' In: ''Biotechnology journal.'' Band 9, Nummer 2, Februar 2014, S.&nbsp;282–293, {{ISSN|1860-7314}}. {{DOI|10.1002/biot.201300199}}. PMID 24497389.</ref>

== Einzelnachweise ==
<references />

[[Kategorie:Protein]]
[[Kategorie:Fluoreszenzfarbstoff]]
[[Kategorie:Indikator (Chemie)]]
[[Kategorie:Biochemisches Nachweisverfahren]]
[[Kategorie:Zellbiologie]]
[[Kategorie:Abkürzung]]
[[Kategorie:Biophysikalische Methode]]